封閉用正常羊血清主要用于免疫學(xué)技術(shù)的相關(guān)實驗中,作為山羊制備抗體的同種屬的非免疫血清,封閉組織上帶電荷集團,降低非特異性背景染色。 即用型試劑。直接使用,無需稀釋。 2~8℃保存。
加拿大樹膠主要用于生化研究。鏡片及蓋玻片膠粘,貼附顯微鏡標(biāo)本。用作清漆。。加拿大樹膠溶于二甲苯后,它的折光率是1.52,接近于玻璃的折光率(1.51),透明度很好,用以封片幾乎無色,干后堅硬牢固,可長期保存。因此,它是封片常用的封藏劑。市售的加拿大樹脂有濃液體和固體兩種。如果是固體,可以在樹膠中加入約相當(dāng)于樹膠體積一半量的二甲苯,放在溫暖處,時常攪拌,促使樹膠溶化。溶化后的較液濃度以膠液能沿玻璃棒一端順利下流為宜(如果要封藏后使它干燥更快,可用苯代替二甲苯)。
OCT冰凍切片包埋劑是一種聚乙二醇和聚乙烯醇的水溶性混合物,目前已廣泛用于免疫組化實驗室中,其用途是在冰凍切片時支撐組織,以增加組織的連續(xù)性,減少皺折及碎裂。又因OCT混合物為水溶性,故在漂片時可溶于水,所以在以后的染色中不會增加背景染色。 利用OCT混合物(opti-mum cutting temperature compound)預(yù)先浸潤組織,然后再進行恒冷箱切片,使切片質(zhì)量得到改善。
封閉血清適用于免疫組化或者免疫熒光實驗中樣本的封閉??梢苑忾]待檢樣本中與蛋白質(zhì)非特異性結(jié)合的位點,另外還可以封閉樣品中內(nèi)源性的Fc片段結(jié)合位點,阻斷抗體與樣品中的Fc受體結(jié)合,從而降低背景,減少假陽性。在選擇封閉血清時,要注意封閉用血清中不能含有目標(biāo)蛋白,且封閉血清來源不能與一抗來源相同,可用與二抗相同來源的封閉血清。
抗熒光衰減封片劑是一種用于減緩熒光衰減的封片試劑。以甘油為基礎(chǔ),加入抗熒光衰減劑,有強烈的抗熒光衰減作用,用于對熒光組織和細(xì)胞樣品的封片。封片后,樣品4℃或者-20℃避光可保存2-3周。本試劑操作簡單,在封片時用移液槍滴一滴抗熒光衰減封片液,蓋上蓋玻片就可以了。
多聚甲醛(Paraformaldehyde)是免疫組織化學(xué)(IHC)和免疫細(xì)胞化學(xué)(ICC)研究中最常用的固定劑之一。該固定劑較為溫和,能很好地保存組織的抗原性和細(xì)微結(jié)構(gòu),適于組織標(biāo)本和細(xì)胞片的較長期保存,非常適合組織和細(xì)胞的光鏡免疫化學(xué)研究。 本產(chǎn)品為4%多聚甲醛的PBS溶液,可直接用于組織和細(xì)胞固定(不含防腐劑)。若需使用其他低濃度多聚甲醛,可使用0.01M PBS按比例稀釋。
油紅O屬于偶氮染料,是很強的脂溶劑和染脂劑,與甘油三酯結(jié)合呈小脂滴狀。脂溶性染料能溶于組織和細(xì) 胞中的脂類,它在脂類中的溶解度比在溶劑中大。當(dāng)組織切片置人染液時,染料則離開染液而溶于組織內(nèi)的脂質(zhì) (如脂滴)中,使組織內(nèi)的脂滴呈橘紅色。